《刺客信條：奧德賽》是系列最RPG化的作品，故事的靈感源自于一出著名的希臘悲劇，玩家可以自由地選擇男性或女性角色來書寫這段史詩，下面帶來的是游戲主線流程攻略。

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序章：溫泉關之戰

玩《奧德賽》前，推薦先去補一部電影：扎克·施耐德導演的《斯巴達300勇士》，電影的內容大概就是將《奧德賽》序章的內容。可以幫助玩家了解整個游戲劇情開頭的歷史背景，增加代入感，不然玩著會一臉懵逼。

劇情結束后，控制列奧尼達王和波斯軍隊廝殺，這里主要是讓玩家熟悉一下本作的戰斗系統，相比起源是稍微有改變的。

以Xbox手柄為例，輕攻擊仍然是RB，重攻擊仍然是RT。按一下X仍然是閃避，按住X是翻滾。

這一作光按LB是不能防御，當敵人攻擊時看好時機按LB+RB才能防反對手，并增加腎上腺素條。

這一作的也有了主動技能，按住LB，再按X,B,A,Y釋放相應的技能。通常消耗一格腎上腺素。

熟悉完操作后，直接控制列奧尼達往懸崖那邊走，觸發劇情。一直在原地廝殺的話，是無法推進腳本的，殺一百年似乎都沒用。

列奧尼達與敵人雙雙掉下懸崖后，開始打BOSS戰，多放技能LB+A，釋放沖刺攻擊技能可以輕松解決掉BOSS。

斯巴達300勇士的結局比較悲慘，由于部隊中出了個叛徒，面對幾十萬波斯大軍本來就沒什么勝算的斯巴達小部隊全員陣亡，但最后他們以300人殺了2萬多的波斯士兵，并為斯巴達整備軍隊贏得了寶貴的時間。

最后列奧尼達王將自己的矛擲在了地上。

畫面一轉，回到現代劇情。《刺客信條：起源》的現代女主角蕾拉·哈桑又回來了，她從石頭堆里翻出了這把列奧尼達矛。

蕾拉回到研究所后，在維多利亞·畢博醫師的幫助下再次回到Animus。選擇完難度后，會有指覽模式和探索模式選擇，指覽模式會幫玩家把所有的任務目標點明確的指出來，探索模式則是讓玩家根據任務提示，使用老鷹去尋找任務目標點。總體來說，是推薦選擇探索模式，代入感更強，指覽模式相對來說更簡單一些。

選擇完模式后，維多利亞·畢博醫師發現了兩個相符的DNA，玩家可以自由選擇扮演男性角色阿利克西歐斯，或者女性角色卡珊德拉。

選擇完畢后，回到西元前431年的凱法隆尼亞島，正值斯巴達與雅典的伯羅奔尼撒戰爭時期，和列奧尼達的溫泉關戰役（斯巴達對波斯）是不同的。這時《刺客信條：奧德賽》的主線才算正式開始，序章結束。